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 行為藥理學(xué)實驗方法與技術(shù)簡介
 
行為藥理學(xué)主要研究藥物對大腦學(xué)習(xí)、記憶功能及情緒活動(如焦慮、抑郁等)的影響,也包括藥物依賴性的實驗評價。
 
一、學(xué)習(xí)、記憶實驗法和記憶障礙動物模型簡介
 
學(xué)習(xí)和記憶是腦的重要功能之一。學(xué)習(xí)是指新行為(經(jīng)驗)獲得和發(fā)展,記憶就是使獲得的經(jīng)驗保持和再現(xiàn)。人類記憶區(qū)可分為三種存貯系統(tǒng),即感覺記錄系統(tǒng),短時存貯系統(tǒng)和長時存貯系統(tǒng)。目前關(guān)于學(xué)習(xí)記憶的機制,認(rèn)為感覺記憶即感知事物后在極短時間內(nèi)的記憶,與腦的電活動有關(guān);短時記憶長時記憶可能與腦的神經(jīng)細(xì)胞的突觸效能或腦的化學(xué)變化有關(guān),即學(xué)習(xí)、記憶有賴于全腦的整合功能,完成記憶的過程離不開知覺、情緒、注意、意圖等心理功能,也離不開早已貯存的知識和經(jīng)驗。
 
(一)動物學(xué)習(xí)、記憶實驗方法及模型:
1、跳臺法(step down test 簡便易行,有較高的敏感性,尤適合于初篩藥物。可同時觀察藥物對記憶過程及對學(xué)習(xí)的影響。
2、避暗法(step through test 利用鼠類的嗜暗習(xí)性而設(shè)計。簡便易行,對記憶過程特別是對記憶再現(xiàn)有較高的敏感性。
3、穿梭箱(shuttle box 可同時觀察被動和主動回避性反應(yīng)。
4、爬桿法(pole-jump text)適用于大鼠或小鼠。觀察非條件刺激和條件刺激對動物逃避行為的影響。
5、迷宮(maze) 學(xué)習(xí)、記憶的經(jīng)典實驗,至今仍經(jīng)常采用。常用的裝置有Y型迷路、水迷路和Morris水迷宮。
6、小雞的一次性味覺----回避學(xué)習(xí)行為的動物模型   Cherkin等人(1969)在前人研究的基礎(chǔ)上,根據(jù)小雞在自然環(huán)境中先天性的自發(fā)啄食行為而建立的小雞一次性味覺-回避學(xué)習(xí)行為(one-trial-avoidance task)的實驗?zāi)P汀F鋬?yōu)點:建立模型快,記憶保持良好;腦內(nèi)注射方便;實驗重復(fù)性好;實驗成本低等。
7、操作式條件反射(operant conditioned reflex 在巴甫洛夫經(jīng)典的條件反射的基礎(chǔ)上創(chuàng)立的一種實驗方法,通過動物完成壓桿或按鍵反應(yīng)的特定活動來研究動物的學(xué)習(xí)行為。
 
(二)記憶障礙動物模型
    1、記憶獲得障礙模型 應(yīng)用抗膽堿藥物制備,常用東莨菪堿、樟柳堿。
    2、記憶鞏固障礙模型 如電休克、缺氧、使用蛋白質(zhì)合成抑制劑(如環(huán)己酰亞胺、氯霉素等)。
    3、記憶再現(xiàn)缺失模型 如乙醇可明顯干擾記憶再現(xiàn)。
4、其他 小鼠腦缺血-再灌注模型;大鼠中腦動脈結(jié)扎-再灌注模型;腦栓塞模型;基底神經(jīng)核-膽堿系統(tǒng)損傷模型及應(yīng)激引起的學(xué)習(xí)、記憶障礙模型等。
 
二、抗焦慮實驗方法及動物模型簡介
 
焦慮以恐懼、憂慮、緊張不安等精神障礙為主要表現(xiàn),一般認(rèn)為,焦慮模型至少必須符合三個要求:對臨床有效的抗焦慮藥敏感并呈劑量依賴性;不同抗焦慮劑的相對強度應(yīng)與在人體觀察到的結(jié)果類似;能夠區(qū)別抗焦慮劑與非抗焦慮劑的不同效應(yīng)。現(xiàn)有的焦慮模型包括二大類:一類是基于動物非條件反射的模型,根據(jù)其行為特點又可分為:探究行為模型:大鼠高架十字迷宮(the elevated plus-mazetest, EPM)、小鼠明暗穿箱(light-dark transitions)、小鼠爬梯實驗(the staircase test)、孔板實驗(the holiboard test)、大鼠開場實驗(the open field test)等;社會行為模型:大鼠群居接觸實驗(the social interaction test)、分離發(fā)聲實驗(separation vocalization)。另一類是基于條件反射(傳統(tǒng)學(xué)習(xí)模式)的模型,主要有Geller-Seifter沖突實驗(Geller-Seifter conflict test )、安全信號撤除實驗(the safety signal withdrawal test)、Vogel沖突模型(the Vogel’s conflict test)等。這些焦慮模型雖然并非人類焦慮情緒的精確復(fù)制,但對于抗焦慮藥物的評篩及探討焦慮的生化機制發(fā)揮了重要作用。
 
三、抗抑郁實驗方法及動物模型簡介
 
1、藥物之間相互作用模型 一般作為抗抑郁藥初篩手段。主要有:利血平拮抗(reserpine reversal);高劑量阿樸嗎啡的拮抗(antagonism of high dose of apomorphine);5-HT誘導(dǎo)的甩頭行為(5-HT induced head-twitches);小鼠育亨賓增強模型(yohimbine potentiation model in mice)。
2、應(yīng)激模型 包括:行為絕望及其衍生(“behavioural despair”and derivatives),如強迫游泳實驗、懸尾實驗等;獲得性無助(learned helplessness);未預(yù)知的長期應(yīng)激刺激(chronic unpredictable stress);未預(yù)知的長期溫和應(yīng)激刺激(chronic unpredictable mild stress)等。
3、腦損傷模型 嗅球切除模型(olfactory bulbectomy model)。
472s低頻率差式強化程序(differential reinforcement of low rate 72-s schedule)。
 
四、藥物依賴性動物實驗方法簡介
 
    藥物依賴性包括機體依賴性和精神依賴性。機體依賴性的試驗評價以阿片類藥物為代表,通用的實驗方法主要有三種:自然戒斷實驗(spontaneous withdrawal test)、催促戒斷實驗(precipitation withdrawal test)和替代實驗(substitution test)。常用動物:小鼠、大鼠、狗、猴。目前還發(fā)展了用離體組織標(biāo)本進行評價,其方法主要為:已形成阿片依賴性的整體動物身上取其離體組織進行試驗;直接將離體組織放在含阿片類藥物的Krebs液中共浴一段時間后再進行試驗。藥物精神依賴性評價方法中認(rèn)為比較成熟且應(yīng)用較多的主要有兩種:自身給藥試驗(drug self-administration)和藥物辨別試驗(drug-discrimination);80年代后又發(fā)展了一種經(jīng)濟簡便的條件性位置偏愛試驗(conditioned place preference)。
 

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